PLoS ONE: FOSL2 Positivt Regulerer TGF-β1 Signalering i ikke-småcellet Cancer

Abstrakt

Fos-relateret antigen 2 (FRA-2 /FOSL2) tilhører AP-1 transkriptionsfaktor familie. Selv FOSL2 har vist sig at være involveret i forskellige fysiologiske og patologiske processer, er meget lidt kendt om signalveje, der regulerer FOSL2 udtryk og mekanismerne i FOSL2 funktion. Her viser vi, at FOSL2 ekspression reguleres af TGF-β1 og at FOSL2 er påkrævet for TGF-β1-inducerede migration. Vi viser, at FOSL2 interagerer med Smad3

in vitro

in vivo

og dermed opregulerer TGF-p1-induceret signalering svar. Mekanistisk FOSL2 fremmer P300 binding til Smad3 og acetyleringen af ​​Smad3 af P300. Endvidere viser vi, at ekspressionen af ​​FOSL2 korrelerer med aktiveret Smad3 ekspression i klinisk ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) prøver. Sammenfattende den foreliggende undersøgelse viser, at FOSL2 letter TGF-β1-induceret migration ved interaktion med Smad3 i NSCLC og foreslår FOSL2 som en potentiel terapeutisk mål for NSCLC

Henvisning:. Wang J, Sun D, ​​Wang Y, Ren F, Pang S, Wang D, et al. (2014) FOSL2 Positivt Regulerer TGF-β1 Signalering i ikke-småcellet lungekræft. PLoS ONE 9 (11): e112150. doi: 10,1371 /journal.pone.0112150

Redaktør: Jeremy J W. Chen, Institut for Biomedicinsk Institut, Taiwan

Modtaget: Juni 4, 2014, Accepteret: 13. oktober 2014 Udgivet: November 6, 2014

Copyright: © 2014 Wang et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed:. Det forfattere bekræfter, at alle data, der ligger til grund resultaterne er fuldt tilgængelige uden restriktioner. Alle relevante data er inden papiret

Finansiering: Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (81172818; 81.172.215).. Den bidragyder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

TGF-β vej styrer forskellige biologiske processer, herunder celledeling, differentiering, apoptose, og migration [1]. Efter aktiveringen af ​​heteromere type II og type I serin-threonin-kinase receptor komplekser ved TGF-β ligandbinding, er intracellulær signalering initieres ved phosphorylering af receptoren aktiverede Smad proteiner (R-Smads) [2]. Som transkriptionelle faktorer fra TGF-β-vejen, til phosphorylerede Smad2 /3 danner et kompleks med Smad4 og derefter translokerer til kernen regulere transkriptionen af ​​TGF-p pathway målgener [3]. Cellulære reaktioner på TGF-β-signalering er endvidere påvirket af interaktionen af ​​Smad proteiner med cofaktorer (coaktivatorer eller corepressorer) at modulere transkriptionsaktivitet [4].

Fos-relateret antigen 2 (FRA-2 /FOSL2) hører til AP-1 transkriptionsfaktor familie, som omfatter de forskellige isoformer af Fos og Jun [5]. De forskellige FOS proteiner spiller en vigtig rolle i særskilte udviklingsmæssige, fysiologiske og patologiske processer [6], men disse individuelle roller og de involverede mekanismer er endnu ikke klart. FOSL2 udøver en bestemt funktion i knogle udvikling [7], og synes at have selektive fysiologiske og patologiske roller i diverse processer, herunder fotoperiodisk regulering [8], kræft [9], og fibrose [10]. Flere tidligere undersøgelser har vist, at FOSL2 spiller en central rolle i reguleringen af ​​TGF-β vej. For eksempel er FOSL2 overudtrykkes i systemisk sklerose (SSC) og fungerer som en hidtil ukendt nedstrøms mediator af den profibrotic cytokin TGF-β [11]. I kardiale fibroblaster, FOSL2 som en transkriptionel regulator kan inducere TGF-β-ekspression [10]. Desuden FOSL2 er nødvendig for TGF-β-induceret lysyloxidase-like 4 (LOXL4) udtryk i reguleringen af ​​ekstracellulær matrix (ECM) syntese og remodellering [12]. Men det er uvist, om FOSL2 regulerer TGF-β vej i carcinogenese.

Den foreliggende undersøgelse blev indledt for at undersøge, hvilken rolle FOSL2 i TGF-β-induceret migration. Ekspressionen af ​​FOSL2 blev øget efter TGF-β behandling og var nødvendig for TGF-β1-inducerede migration. FOSL2 blev også vist sig at binde til Smad3 at modulere TGF-β-inducerede signaleringsresponser.

Materialer og metoder

Etik Statement

Patientinformation og prøver blev opnået med skriftligt informeret samtykke. Hver patient i denne undersøgelse gav skriftligt informeret samtykke til at offentliggøre disse case detaljer. Forskningen blev godkendt af den etiske komité i Harbin Medical University Cancer Hospital.

cellelinjer, cellekultur og transfektion

Den menneskelige lunge adenocarcinom cellelinje A549 og humane embryonale nyre cellelinje 293T var indkøbt fra American Type Culture Collection (ATCC) og opretholdt i DMEM suppleret med 10% føtalt bovint serum (FBS) (Invitrogen) indeholdende 100 enheder /ml penicillin og 100 enheder /ml streptomycin (Sigma) ved 37 ° C med 5% CO

2. Til induktion af EMT, A549-celler blev dyrket i 10% FBS i 24 timer og derefter holdt i 72 timer i serumfrit medium i nærvær af 2 ng /ml TGF-β1 (R anti-p300, anti-Smad3, og anti-GST fra Santa Cruz; anti-acetyleret-lysin fra Cell Signaling Technology; anti-p-smad3 fra Abcam; Alexa Fluor 488 æsel-anti-muse IgG og Alexa Fluor 546 æsel anti-kanin IgG fra Invitrogen. siRNA’er for FOSL2 og den negative kontrol blev opnået fra Dharmacon.

Immunfældning og Western blotting-analyse

Ved 24 timer efter transfektion blev cellelysaterne høstet ved anvendelse lysepuffer (50 mM Tris, pH 8,0, 150 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50 mM NaF og 0,1% NP-40) og inkuberet med protein A eller G Sepharose-perler og de egnede antistoffer i 2 timer ved 4 ° C. Efter omfattende vask blev de immunopræcipiterede proteiner kogt i protein prøvebuffer i 5 minutter og derefter separeret ved SDS-PAGE, overført til PVDF-membraner (Millipore), og påvist ved western blotting-analyse.

GST pull-down assay

GST og GST-Smad3 fusionsproteiner blev udtrykt i BL21 celler og oprenset i overensstemmelse med producentens instruktioner (GE Healthcare Life Science). FLAG-mærket FOSL2 konstruktioner blev udtrykt i HEK 293T-celler. Helcelle-proteinlysater blev høstet efter 48 timer ved anvendelse af cellelyse-buffer, klaret ved hjælp af glutathion Sepharose-perler, og derefter inkuberet med enten GST-Smad3 eller kontrol GST i 2 timer ved 4 ° C. Perlerne blev vasket fem gange med GST-bindingsbuffer, elueret i 40 pi 2 x SDS-prøvebuffer, og derefter detekteres ved immunblotting.

Transskription Reporter Assay

Celler blev behandlet med eller uden 2 ng /ml TGF-β1 ved 20 timer efter transfektion. Cellerne blev derefter høstet og analyseret med Dual Luciferase Reporter Assay System (Promega). Alle analyser blev udført i tre eksemplarer, og alle værdier blev normaliseret til transfektion effektivitet mod

Renilla

luciferaseaktiviteter.

Real-time RT-PCR (QRT-PCR)

I alt RNA’er blev opnået under anvendelse af TRIzol-reagens (Invitrogen). Revers transkription af RNA blev udført ved anvendelse af ImProm-II revers transkription-system (Promega) ifølge producentens instruktioner. Kvantitativ revers transkriptase (QRT) -PCR blev udført under anvendelse af en ABI PRISM 7500 Sequence Detector System (Applied Biosystems) med genspecifikke primere for p21 og PAI-1.

Immunofluorescens

A549-celler var dyrket i en 6-brønds plade og behandlet med TGF-β1 (2 ng /ml). Cellerne blev derefter fikseret med 4% paraformaldehyd, permeabiliseres med 0,1% Triton X-100 og inkuberet med primære antistoffer mod FOSL2 eller Smad3 i 1 time ved 37 ° C. Cellerne blev derefter inkuberet med Alexa Fluor 488 eller Alexa Fluor 546-antistoffer i 30 minutter ved 37 ° C. De fluorescerende billeder blev taget med et konfokal laser-scanning mikroskop.

Immunhistokemi

Vævsprøver blev indlejret i paraffin. Snittene blev deparaffinised i xylen og rehydreret i en ethanol-gradient. Efter antigen-genvinding blev snittene behandlet med 3% H

2O

2 i 10 minutter, efterfulgt af 5% bovint serumalbumin (BSA) i 30 min. Snittene blev derefter inkuberet med primære antistoffer. Visualisering af antistof-binding blev udført ved anvendelse af DAB-farvning. Kernerne blev farvet med hæmatoxylin. Immunofarvningen resultater blev uafhængigt vurderet to patologer.

Patienter

Lungekræft prøver (n = 57) blev indsamlet fra patienter med NSCLC i Harbin Medical University Cancer Hospital fra 2009 til 2012. væv blev opbevaret ved -80 ° C indtil anvendelse. Alle prøver var fra patienter, som ikke havde undergået præoperativ strålebehandling eller kemoterapi. Den patologiske stadieinddeling af de 57 tumorer blev udført ifølge det tumor-knude-metastaser (TNM) staging system.

cellemigrationsassay Salg

Migration assays blev udført med 8 um filtre (BD Biosciences ). Hver brønd blev fyldt med ~ 1 x 10

5-celler. Efter inkubation i 16 timer blev cellerne passerer gennem filteret ind i de nederste brønde fikseret i formalin og farvet med krystalviolet. Cellerne i 10 tilfældigt udvalgte felter (200 ×) fra hver brønd blev talt.

Statistiske Analyser

Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS17.0 software. Andre statistiske analyser blev udført ved anvendelse af en Student t-test. Kaplan-Meier overlevelsesanalyse til evaluering samlede overlevelsestid blev udført ved log-rank test. Dataene er vist som middelværdi ± SD fra 3 uafhængige assays. En statistisk signifikant forskel blev anset når

P

. 0,05

Resultater

FOSL2 er nødvendig for TGF-β1-induceret migration

For at begynde at undersøge muligheden for, at FOSL2 ekspression reguleres af TGF-β1 behandlede vi A549-celler med TGF-β1 i løbet af et tidsforløb spanning 24 timer til 72 timer og udføres en western blot-analyse. Resultaterne viste, at FOSL2 niveauer steg betydeligt i afhængighed af TGF-β1 behandling i denne cellelinie (figur 1A). De maksimale FOSL2 ekspressionsniveauer på 72 timer var ca. 4 gange højere end i kontrolgruppen basale niveau (figur 1A). Dernæst testede vi, om FOSL2 deltager i TGF-β1-induceret migration. For at udforske denne mulighed, vi slået ned FOSL2 ekspression i A549-celler, og en Western blot-analyse indikerede, at FOSL2 niveauer langt var faldet i forhold til kontrolcellerne (figur 1b). Derefter undersøgte vi regulerende effekt af FOSL2 på vandrende evne A549 celler ved hjælp af en Transwell migration assay. TGF-β1 behandling dramatisk fremmet migrering af A549-celler, hvorimod vælte FOSL2 afskaffet cellemigrering under tilstedeværelse af TGF-β1 (Fig 1C). Derudover undersøgte vi også morfologiske ændringer af A549-celler efter eksponering for TGF-β1. I fravær af TGF-β1, cellerne opretholdt en klassisk brosten epitelial morfologi og vækstmønster, men cellerne anlagt en mere fibroblastlignende morfologi og reducerede deres celle-celle-kontakt efter TGF-β1 stimulation; dog blev denne effekt inhiberet af FOSL2 depletion (figur 1D).

(A) A549-celler blev inkuberet med TGF-β1 (2 ng /ml) i de angivne tidsrum, og cellerne blev opsamlet til western blot analyse. GAPDH blev anvendt som en loading kontrol. (B) FOSL2 niveauer blev undersøgt ved western blotting i FOSL2-siRNA og sicontrol A549 celler. GAPDH blev også bestemt som en loading kontrol. (C) Cell migration blev målt ved anvendelse Transwell assays i sicontrol og siFOSL2 A549-celler med eller uden TGF-β1 (2 ng /ml) behandling. Cellerne migrerer til den nedre overflade af Transwell filtre blev fotograferet (øverst) og talt (nederst). (D) siControl og siFOSL2 A549-celler blev inkuberet med eller uden 2 ng /ml TGF-β1 i 72 timer. Fasekontrastmikroskopi viser cellen morfologiske ændringer.

FOSL2 interagerer med Smad3

Fordi Smad2 /3-proteiner er de transkriptionelle effektorer af TGF-β1 signalering, undersøgte vi, om inhibering af TGF-β1-inducerede migration af FOSL2 depletering blev medieret ved interaktion med disse Smads. For at teste, om der er et samspil mellem FOSL2 og Smad3 in vivo, vi brugte cellelysater fra 293T celler transficeret med ekspressionsplasmider for Flag-mærket FOSL2 og Myc-mærkede Smad3 og fandt, at FOSL2 kunne være co-udfældet med Smad3 (figur 2A) , mens en vekselvirkning mellem FOSL2 og Smad2 ikke blev observeret (data ikke vist). Vi derefter afgøres, om endogene FOSL2 og Smad3 også interagere. Som vist i figur 2B, endogen FOSL2 forbundet med Smad3 i A549-celler, og interaktionen var især tydelig i nærvær af TGF-β1. Desuden FOSL2 colocalised med Smad3 i nærvær af TGF-β1 (figur 2C). For at bestemme om FOSL2 direkte interagerer med Smad3, vi udførte GST pull-down-analyser. Ækvivalente mængder af GST-Smad3 eller GST-protein alene, blev inkuberet med Flag-tagget FOSL2. FOSL2 direkte interageret med Smad3, men ingen interaktion af Smad3 var tilsyneladende med GST proteinet (figur 2D).

(A) FOSL2 interagerer med Smad3 in vivo. FLAG-FOSL2 og Myc-Smad3 blev co-transficeret ind HEK293T celler. Cellelysater blev høstet, og IP blev udført med et anti-Myc-antistof. FOSL2 og Smad3 blev påvist fra immunopræcipitaterne ved Western blotting med de angivne antistoffer. (B) Sammenhængen mellem endogene FOSL2 og Smad3 i A549 celler med TGF-β1 (2 ng /ml) behandling. Immunpræcipitation blev udført under anvendelse af et anti-IgG-antistof eller anti-Smad3 antistof. (C) Subcellulær colocalisation af FOSL2 og Smad3 i A549-celler i nærvær TGF-β1 (2 ng /ml). Kernerne blev farvet med DAPI. (D) Ækvivalente mængder af GST-Smad3 eller GST alene blev inkuberet med cellelysater fra HEK 293T celler, der overudtrykker Flag-FOSL2; 10% af det tilførte blev kørt på gelen som en kontrol. GST-Smad3 blev påvist ved farvning geler med Coomassie blå.

FOSL2 modulerer TGF-p1-induceret signaleringsresponser

Vi næste undersøgt effekten af ​​FOSL2 ekspression på TGF-β1- afhængige transkriptionelle svar ved brug af 3TP-Lux reporter. Co-ekspression af FOSL2 resulterede gradvist i en opregulering af Smad3-induceret reporteraktivitet (figur 3A). Omvendt blev reporteraktivitet faldet i A549-celler transficeret med FOSL2 siRNA (siFOSL2) i forhold til kontrolcellerne transficeret med scrambled siRNA (figur 3B), hvilket bekræfter, at endogen FOSL2 regulerer Smad3 aktivitet.

(A) HEK 293T celler blev transficeret med reporter p3TP-Lux plasmid der huser Smad3 i fravær og nærvær af FOSL2, som angivet. Cellerne blev høstet ved 36 timer efter transfektion og analyseret for luciferaseaktivitet. Dataene er midlet ± s.d. (B) A549-celler blev transficeret med siFOSL2 og styring scrambled siRNA. Efter 24 timer blev cellerne transficeret med p3TP-Lux og Smad3, som tiltalt. Luciferaseaktivitet blev analyseret efter yderligere 24 timer. Dataene er middelværdier ± s.d. (C) A549-celler transficeret med siFOSL2 og kontrol scrambled siRNA blev stimuleret med 2 ng /ml TGF-β1 i 4 timer. Total mRNA’er blev analyseret ved QRT-PCR under anvendelse af primere specifikke for p21 og PAI-1. Dataene er middelværdier ± s.d. (D) A549-celler transficeret med siFOSL2 og kontrol scrambled siRNA blev stimuleret med 2 ng /ml TGF-β1 i 4 timer og derefter høstet til frembringelse cellelysater. Ekspressionsniveauerne for de angivne proteiner blev undersøgt ved western blotting med de relevante antistoffer, som angivet.

Vi vurderede dernæst virkningen af ​​FOSL2 knockdown på den endogene ekspression af TGF-β1 /Smad3 målgener. I A549-celler, TGF-β1 behandling inducerede hurtig ekspression af p21 og PAI-1 mRNA’er, og knockdown af FOSL2 betydeligt svækkede disse virkninger (figur 3C). Konsekvent, TGF-β1-inducerede p21 og PAI-1 ekspression på proteinniveauet blev inhiberet i A549-celler efter FOSL2 depletion (figur 3D).

FOSL2 fremmer P300 binding til Smad3 og acetyleringen af ​​Smad3 af P300

det er velkendt, at CBP /p300 samarbejder med Smad komplekse at regulere TGF-β målgen transkription, som stabiliserer den transskriptionelle aktivitet af Smad kompleks og dermed øger varigheden af ​​TGF-β-signalering. For yderligere at undersøge mekanismen for regulering af FOSL2 i TGF-β-signalering, vi undersøgt, om FOSL2 påvirker TGF-β1-induceret dannelse af Smad3 /p300-kompleks. Samspillet mellem Smad3 og p300 blev induceret ved TGF-β1 stimulation, og denne interaktion blev dybt forøget ved ektopisk ekspression af FOSL2 (figur 4A). I modsætning hertil blev Smad3 og p300 interaktion svækket af knockdown af FOSL2 (figur 4B). Fordi Smad3 acetylering af p300 positivt regulerer sin transkriptionsaktivitet, vi derfor undersøgt, om FOSL2 er involveret i denne proces. For at teste denne mulighed blev 293T-celler transficeret med Myc-Smad3 alene eller sammen med p300 eller FOSL2. Som vist i figur 4C, p300 inducerede acetylering af Smad3, og FOSL2 overekspression væsentligt forbedret denne acetylering. Desuden endogene FOSL2 udtynding undertrykte acetylering af Smad3 af p300 i A549-celler (figur 4D).

(A) HEK293T celler blev cotransficeret med ekspressionsplasmider for HA-p300 og FLAG-FOSL2 sammen med Myc-Smad3 som anført, med eller uden med TGF-β1 (2 ng /ml) behandling. Smad3-bundet p300 blev immunopræcipiteret med et anti-Myc-antistof og påvises ved western blotting med et anti-HA-antistof. (B) A549-celler blev transficeret med siFOSL2. Efter 24 timer blev cellerne behandlet, som angivet, med TGF-β1 (2 ng /ml) behandling. (C) HEK293T celler blev transient transficeret med de angivne plasmider. Cellerne blev inkuberet i nærvær af TSA (5 uM) i 20 timer. Cellelysater blev immunpræcipiteret (IP) med et anti-Myc-antistof, og acetyleret Smad3 (Ac-Smad3) blev detekteret ved western blotting med et anti-acetyleret lysin-antistof. (D) A549-celler blev transient transficeret med de anførte plasmider. blev udført forsøgene som beskrevet i fig. 4C.

Korrelation af FOSL2 og aktiveret Smad3 udtryk i NSCLC tumorer

For yderligere at undersøge den kliniske forhold mellem FOSL2 og TGF-β1 signalering, udtryk for FOSL2 og p-Smad3 i 57 NSCLC prøver blev undersøgt ved immunohistokemiske metoder, og korrelationer af proteinerne blev vurderet. Ud af 57 sager, 35 var patologisk trin I, og 22 var i pStage III. Af de 35 tilfælde i pStage I, 31 (88.6%) viste en lavere ekspression af FOSL2 og p-Smad3 proteiner; imidlertid 18 af de 22 tilfælde (81,8%) i pStage III viste en højere udtryk for begge proteiner (figur 5A). Desuden blev FOSL2 ekspression positivt korreleret med p-Smad3 farvning (P 0,001) (figur 5B). Kaplan-Meier-overlevelseskurver viste, at patienter med FOSL2 højere ekspression var på en særlig større risiko for en tidligere død end dem med FOSL2 lavere ekspression (P = 0,0059) (figur 5C). Derfor er disse resultater viste, at FOSL2 ekspression i lungekræft væv korrelerer med postoperativ tilbagefald og overlevelse af lungecancerpatienter.

(A) Immunohistokemisk analyse af FOSL2 og p-Smad3 i 57 NSCLC samples. (B) FOSL2 udtryk er positivt korreleret med p-Smad3 udtryk i NSCLC prøver. Semikvantitativ scoring blev udført (Pearson korrelation test r = 0,858, p 0,001). Bemærk, at nogle af de prikker på graferne repræsenterer mere end ét eksemplar (nogle scoringer overlappede). (C) Kaplan-Meier-overlevelseskurver for NSCLC patienter med FOSL2 højere eller lavere udtryk. Forskellen i postoperative overlevelse mellem NSCLC patienter med FOSL2 højere udtryk og med FOSL2 lavere udtryk var stærkt signifikant (

P

= 0,0059 ved log-rank test).

Diskussion

Vores resultater viser, at FOSL2 opregulering er nødvendig for TGF-β1-induceret migration. Inhiberingen af ​​FOSL2 ekspression forhindrede TGF-β1-inducerede migration og de tilknyttede morfologiske ændringer. Kollektivt antyder disse resultater, at FOSL2 er en vigtig bestanddel af en regulerende netværk i TGF-β1-inducerede migration.

Smad3 er et centralt signal transducer i TGF-β1-inducerede signaleringsveje [13]. I et forsøg på yderligere at belyse forholdet mellem FOSL2 og Smad3, identificerede vi FOSL2 som en co-faktor for Smad3. Hvordan FOSL2 funktioner i celler ikke er blevet karakteriseret til dato [14]. Vi først valideret de fysiske interaktioner mellem FOSL2 med Smad3. I kernen, Smad oligomerer rekruttere de transkriptionelle co-aktivatorer p300 /CBP [15] – [17], som er strukturelt beslægtede proteiner med histonacetyltransferase (HAT) aktivitet. Acetylering er en posttranslationel modifikation af proteiner, med histoner er det bedst kendte eksempel [18]. Smad3 er et direkte mål for de transkriptionelle co-aktivatorer p300 /CBP, og denne acetylering stimuleres af TGF-β [19]. Det er imidlertid ikke klart, om der er andre proteiner, som letter denne proces. I denne rapport, viser vi, at FOSL2 fremmer P300 binding til Smad3 og Smad3 acetylering af P300, hvilket tyder på, at FOSL2 spiller en positiv rolle i reguleringen af ​​TGF-β-signalering.

Metastase er en meget kompleks proces, der involverer udslip af tumorceller fra den primære tumor masse, migration og invasion gennem basale membraner og bindevæv, indrejse i det vaskulære eller lymfesystemet, overlevelse i kredsløbet, ekstravasation på forskellige organer sites (herunder tilknytning til endotelceller og diapaedesis tværs af endotel), og proliferation til dannelse af et fjernt metastase [20] – [22]. Tidligere resultater har vist, at FOSL2 overekspression fører til et øget invasiv potentiale i brystcancerceller, men mekanismen er ikke blevet belyst hidtil [23]. I betragtning af, at TGF-β1 kan udnytte forskellige programmer til fremme af kræft metastase gennem dens virkninger på tumor mikromiljø, forbedrede invasive egenskaber, og hæmning af immun celle funktion, vores resultater viser også, at FOSL2 kan øge invasive potentiale gennem TGF-β vej. Desuden vores kliniske resultater af en korrelation mellem FOSL2 og aktiveret Smad3 udtryk i NSCLC tumorer yderligere bekræfte denne konklusion. Disse resultater fremhæve bidrag FOSL2 til ikke-småcellet tumorudvikling og øge muligheden for at hæmme FOSL2 i NSCLC terapi.

Sammenfattende giver vi den første bevis på, at FOSL2 letter TGF-β1-induceret migration i NSCLC celler ved interaktion med Smad3 og dermed fremmer P300 binding til Smad3 og Smad3 acetylering af P300, begivenheder, der kan bidrage til udviklingen af ​​NSCLC og foreslå FOSL2 som en potentiel terapeutisk mål i NSCLC.

Tak

Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (81172818; 81.172.215).