PLoS ONE: Serum HE4: An Independent Prognostisk faktor i ikke-småcellet lungekræft

abstrakt

Humane epididymis sekretorisk protein 4 (HE4) er et secerneret glycosyleret protein kodet af WAP fire-disulfid kerne domæne 2 (

WFDC2

) genet, lokaliseret på et kromosom 20 segment der ofte amplificeret i mange cancertyper. Denne undersøgelse har til formål at bestemme serum HE4 prognostisk værdi i ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), at følge de retningslinjer bemærkning. Serumprøver fra 346 konsekutive patienter med histologisk påvist og tidligere ubehandlede NSCLC og 41 patienter med benign lungesygdom blev indsamlet i Montpellier-Nîmes Academic Hospital. Work-up undersøgelser udført for at bestemme sygdommen egenskaber og behandling algoritmer var kongruent med internationale retningslinjer. HE4-niveauer i serum blev målt med en ELISA-test (FUJIREBIO Diagnostics), der bruger to monoklonale antistoffer, 2H5 og 3D8, mod det C-WFDC domæne af HE4. Arealet under ROC-kurven (dvs. til den samlede evne HE4 skelne mellem kontroller og patienter) var 0,78 (95% konfidensinterval [CI], 0,738-0,821; z test

P

0,0001). Serum HE4 niveauer signifikant højere hos patienter med dårligere performance status, avanceret TNM stadie og positiv nodal status. I Cox modellen, samlede overlevelse var kortere hos patienter med høj forbehandling serum HE4 (over 140 pmol /l) end hos patienter med serum H4 niveau ≤ 140 pmol /L [median overlevelse: 17,7 uger (95% CI, 11,9-24,9) og 46,4 uger (95% CI, 38,6-56,3), henholdsvis; hazard ratio: 1,48 (95% CI, 1,12-1,95) for høj HE4; justeret

P

= 0,0057]. Højt serum HE4 niveau diagnose er en uafhængig faktor for dårlig prognose i NSCLC

Henvisning:. Lamy P-J, Plassot C, Pujol J-L (2015) Serum HE4: En uafhængig Prognostisk faktor i ikke-småcellet lungekræft. PLoS ONE 10 (6): e0128836. doi: 10,1371 /journal.pone.0128836

Academic Redaktør: Ramon Andrade de Mello, University of Algarve, Portugal

Modtaget: November 28, 2014 Accepteret: April 30, 2015; Udgivet: 1 juni 2015

Copyright: © 2015 Lamy et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden for papir og dens støtte Information filer

Finansiering:. undersøgelsen blev støttet af bevilling fra FUJIREBIO Diagnostics. HE4 assays kits blev leveret af FUJIREBIO Diagnostics. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:. Pierre-Jean Lamy har modtaget honorarer fra FUJIREBIO Diagnostics. Undersøgelsen blev støttet af bevilling fra FUJIREBIO Diagnostics. HE4 assays kits blev leveret af FUJIREBIO Diagnostics. Der er ikke yderligere patenter, produkter i udvikling eller markedsførte produkter til at erklære. Dette ændrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikker om datadeling og materialer, som beskrevet online i vejledningen for forfattere.

Introduktion

identifikation af prognostiske faktorer for ikke- småcellet lungekræft (NSCLC) er et vigtigt mål i både kliniske forsøg og rutinemæssig praksis [1,2,3,4]. I kliniske forsøg, skal der træffes prognostiske co-variable i betragtning i overlevelse analyser. For eksempel, i et randomiseret forsøg, udsagnet om, at en forskel i overlevelse er relateret til effekten af ​​behandlingen i henhold til undersøgelsen skal understøttes af en proportional farer model viser, at denne effekt ikke afhænger kendte prognostiske faktorer, såsom sygdom stadie eller performance status [5,6]. I rutinemæssig praksis, kan terapeutisk beslutningstagning være påvirket af prognostiske variabler [4]. De mest udbredte accepterede prognostiske faktorer i NSCLC er sygdom etape, nodal status og performance status [7]. Adskillige andre funktioner, især mandlige køn, alder, ikke-pladecellekræft histologi, er forskellig rapporteret som negative prognostiske faktorer [2,8]. For nylig, molekylære biomarkører, såsom EGFR mutationer og ALK translokationer, er blevet indført som theragnostic markører for lungeadenocarcinom.

Menneskelige epididymis sekretorisk protein 4 (HE4) er et udskilt glycosyleret protein tilhører WFDC (tidligere benævnt WAP ) familie. WAP fire-disulfid kerne domæne 2 (

WFDC2

), genet kodende HE4, er placeret på kromosom 20, i et segment hyppigt amplificeret i mange cancere (bryst-, ovarie-, colon-, bugspytkirtel og lunger) [9 ]. Andre proteiner i denne familie indbefatter sekretorisk leukocyt Peptidase Inhibitor, Elafin, og PS20 [10]. Medlemmer af WFDC familien er kendetegnet ved tilstedeværelsen af ​​en eller flere WFDC domæner af ca. 50 aminosyrer i længde, der indeholder otte særdeles konserverede cysteinrester forbundet af fire disulfidbindinger [11]. HE4 er en proteasehæmmer, der blev identificeret i epitel af bitestiklen og er involveret i sperm modning [12]. Proteinet viser karakteristika for en sekretorisk protein, med et signalpeptid, efterfulgt af en lille (ca. 10 kDa), sure (pI 4,3) og cystein-rige polypeptid [12]. Dens rolle i andre væv fortsat uklar. Det er blevet foreslået, at det kan være involveret i de medfødte immunforsvar forsvar af luftvejene, nasale og orale kaviteter og i udviklingen af ​​lungeadenocarcinom [13]. Desuden HE4 er overudtrykt i ovariecancer, især i serøs, klar celle og endometroid epiteliale ovariecarcinomer [14], og secerneres tidligt i serum fra patienter med ovariecancer [15]. Adskillige forsøg er blevet gjort for at karakterisere ovariecancer bruger multi-parametriske modeller af genekspression, herunder HE4 mRNA [16] [17]. Mange publikationer har vist, at serumniveauer af HE4 og CA125 kan bruges til tidlig påvisning af kræft i æggestokkene tilbagefald og at klassificere patienter med bækken masse som ved høj eller lav risiko for ovariecancer malignitet [18,19]. Dens specificitet er højere end for CA125, især i den tidlige stadie sygdom og i præmenopausale kvinder [20]. Serum HE4 niveau er korreleret med tumor fase [21], alder og rygning status [22]. Vigtigere er det ikke forhøjet i godartede gynækologiske betingelser og endometriose [23]. Men HE4 ikke kræftspecifikke æggestokkene. Faktisk

WFDC2

udtrykkes kraftigt i normale humane luftrøret og spytkirtler og, i mindre grad, i lunge, prostata, hypofyse, skjoldbruskkirtel og nyrer. Moderat til høje niveauer er også blevet påvist i lunge adenocarcinom og lejlighedsvis, i bryst, overgangsordning celle og bugspytkirtelcarcinomer [24]. Bestemt bliver HE4 udtrykt i de fleste lung adenokarcinomer og i et betydeligt antal skællede, småcellet og storcellede carcinomer i lunge, hvilket antyder, at den kunne anvendes som en diagnostisk og /eller prognostisk faktor til at forfine standard patologisk analyse [13] . Ja, i lunge adenocarcinom, nodal status og HE4 udtryk er selvstændige prognostiske faktorer af sygdomsfri og samlet overlevelse [25]. Derudover blev høje serum og pleural effusion koncentrationer af HE4 tidligere observeret i NSCLC [26,27] og tre undersøgelser antydet, at HE4 kunne være en potentiel diagnostisk og prognostisk markør i NSCLC [28,29,30].

Formålet med vores undersøgelse var således at bestemme den diagnostiske og prognostiske værdi af HE4 serum niveau ved hjælp af 346 prøver fra en serum biobank dedikeret til validering af biomarkører i lungekræft og efter bemærkning (Rapportering Anbefalinger til tumormarkør prognostiske Studies) retningslinjer [31 ].

Materialer og metoder

patienter

Serumprøver fra 346 konsekutive patienter med NSCLC henvist til Montpellier-Nîmes Universitetshospital, Frankrig, fra januar 1995 og i december 1997, anvendt til denne undersøgelse. Disse prøver er en del af en stor biobank (Biobank nummer BB-0033-00.059-certificeret AFNOR 96-900), der blev startet i 1990 for at indsamle serumprøver fra patienter med NSCLC med det mål at bestemme fremadrettet den prognostiske betydning af nye serum tumormarkører . Konkret biobanken protokollen definerede de kliniske variabler, der skal registreres, at udvælgelseskriterierne og de statistiske metoder anvendes. Den metode ikke ændre sig over tid. Alle biobank prøver er forbundet med omfattende kliniske data, der blev prospektivt optaget og prøverne opbevaret ved-180 ° C (in triplo). Men denne undersøgelse var retrospektive fordi beslutningen om at teste HE4 er taget for nylig. Denne undersøgelse blev gennemgået og godkendt af ICM Institutional Review Board kaldet “Comité d’Organisation de la Recherche Translationnelle” (CORT). Ifølge den franske lovgivning, samtykke til sekundær anvendelse af menneskeligt biologisk materiale er under en juridisk ordning for “ikke-opposition” (opt-out): Efter information til ny anvendelse fra forskere, kan humane biologiske prøver anvendes, undtagen i tilfælde af modstand fra donoren. Derefter informere samtykke blev ikke opnået fra patienterne, men patientjournaler /oplysninger blev anonymiseret og de-identificeret før analyse.

Kun serumprøver fra patienter med NSCLC histologisk påvist og tidligere ubehandlet NSCLC blev anvendt til denne undersøgelse. NSCLC kræftformer blev klassificeret i henhold til den histologiske WHO klassifikation; dog blev den sidste revision vedrørende den nye taksonomi af adenokarcinomer ikke taget hensyn til [32] og adenocarcinom blev betragtet som et generisk sub-histologisk type. Performance status blev estimeret ved hjælp af Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) score, og procentdelen af ​​vægttab i løbet af de foregående fire måneder blev indspillet. Iscenesættelse blev udført i overensstemmelse med den

Union for International Cancer Control

(UICC) tumor node metastase (TNM) klassificering i brug på tidspunktet for diagnosen [33] og American Thoracic Society kort over regionale pulmonale knuder [34 ]. De følgende undersøgelser blev gennemført: klinisk undersøgelse, standard bryst roentgenography, computertomografi (CT) scanning af brystet, øvre mave og hjerne, fiberoptiske bronkoskopi, lever sonografi og knogle scintigrafi. Mediastinoscopy blev udført for at etablere node status hos patienter med ikke-metastatisk NSCLC, men tegn på mediastinal lymfeknude udvidelsen på brystet CT-billeder.

Controls

Serumprøver blev indsamlet fra 41 patienter i træk med ikke-maligne lungesygdomme (infektionssygdomme, kroniske obstruktive lungesygdomme og diverse). Patienterne i kontrolgruppen har lignende median alder (60 år) og køn ration end patienter i lungekræft gruppen.

Behandling

En medicinsk panel bestående af thorax kirurger, bryst læger, radiologer, radioterapeuter og medicinske onkologer diskuterede hver patientens journal. Patienter med stadie I-II NSCLC eller resektabel IIIa sygdom blev opereret med det formål at opnå fuldstændig resektion. Patienter med performance status 2 og fjernmetastaser (stadie IV) eller grov mediastinal involvering (fase IIIb og inoperabel stadium IIIa tumor) var berettiget til optagelse på en af ​​cisplatin-baseret kemoterapi forsøg (cisplatin og en tredje generation lægemiddel) udført på Montpellier Universitetshospital. Samtidig strålebehandling blev foreslået til patienter med lokalt fremskreden sygdom [5]. Aktiv understøttende behandling, herunder palliativ strålebehandling, når det er nødvendigt, blev givet til patienter med fremskreden og dårlig performance status. Behandlingen blev besluttet baseret på kliniske og rutinemæssige biologiske resultater og uden kendskab til niveauet af serum markører. Derfor blev behandlingen ikke som en prognostisk variabel i denne undersøgelse.

Laboratoriemetoder

En blodprøve blev indsamlet fra hver patient ved diagnose og serum blev separeret og opbevaret ved -180 ° C, indtil testet. HE4 blev målt ved anvendelse af den kommercielle EIA-metoden (FUJIREBIO Diagnostics, Malvern, PA). Denne test er beregnet til brug med serum og er en fast fase, ikke-kompetitivt immunassay baseret på den direkte sandwich-teknik under anvendelse af to monoklonale museantistoffer, 2H5 og 3D8, mod to epitoper i C-WFDC domæne af HE4. HE4 stede i kalibratorer eller prøver er adsorberet til streptavidincoatede microstrips af det biotinylerede anti-HE4 antistof 2H5 under inkubationen. Strimler derefter vasket og inkuberet med HRP-mærket anti-HE4 mAB 3D8. Efter vask en pufret substrat /kromogent reagens (hydrogenperoxid og 3, 3 ‘, 5, 5’ tetra-methyl-benzidin) tilsat til hver brønd. Under enzymreaktionen en blå farve vil udvikle sig, hvis antigenet er til stede. Farveintensiteten er proportional med mængden af ​​HE4 i prøven og bestemmes ved anvendelse af en mikroplade-spektrofotometer ved 405 nm efter tilsætning af stopopløsning. Kalibreringskurver (kubisk Spline) blev konstrueret for hver analyse ved afbildning af absorbansværdien vs. koncentrationen af ​​hver kalibrator. HE4 koncentrationer i patienternes prøver blev derefter beregnet på grundlag af kalibreringskurven. Den HE4 EIA-analysen måler H4 koncentrationer på mellem 15 og 900 pM. Vi har tidligere valideret testen i vores laboratorium efter COFRAC LAB GTA 04 metodologi. Detektionsgrænsen var 4 pmol /L og bestemmelsesgrænsen var 8 pmol /l. De intra- og inter-assay variationskoefficienter var lavere end 10%. Serum neuron-specifik enolase (NSE) blev målt ved anvendelse af den faste fase to-site immunoradiometrisk assay ELSA NSE (CIS bio International, Gif-sur-Yvette, Frankrig) og serum CYFRA 21-1 blev bestemt ved IRMA-metoden (CIS bio International, Gif-sur-Yvette, Frankrig), som tidligere beskrevet [35]. Andre biologiske variabler testet i denne undersøgelse blev målt før nogen behandling og samtidig til titreringer af tumormarkører (men for HE4) i et laboratorium, der gennemførte god laboratoriepraksis. Den øvre grænse for normale værdier var 10 000 /ml for leukocytter. De nedre grænser for normale værdier var 32 g /l for albumin og 135 mmol /L for serum-natrium.

Statistisk analyse

Receiver Operating Karakteristiske (ROC) kurver blev konstrueret ved hjælp af både patienternes og Controls serum markør niveauer i et forsøg på at etablere følsomheden-specificitet forhold for hver markør. Arealerne under ROC kurver blev beregnet [28]. ROC kurve analyse blev udført ved hjælp af MedCalc statistisk software (Ostend, Belgien). Følsomheden-specificitet forhold blev bestemt ved hjælp af Youden indeks J, som er forskellen mellem den sande positive sats og falsk positive rate. Den normale (Gauss) distribution af serum HE4 niveauer blev testet ved hjælp af ikke-parametrisk Shapiro-Wilk test for ligestilling af kontinuerlige, endimensionale variable. For HE4 i de testede populationer, testen var betydelig, og dermed afvise H0 hypotesen (dvs. viser, at serum HE4 niveau blev ikke fordeles efter Gauss lov). Derfor, for at analysere fordelingen af ​​tumormarkører i undergrupper af patienter, blev resultaterne udtrykt som medianer og variationer som interkvartile område [IR]. Ikke-parametriske statistiske analyser blev anvendt: forskelle mellem to uafhængige grupper blev bestemt ved anvendelse af Mann Whitney U test med Bonferroni korrektion for multiple sammenligninger; forskelle i mere end to grupper blev bestemt ved anvendelse af Kruskal Wallis envejs variansanalyse. Overlevelse blev defineret som intervallet mellem prøvetagning dato og tidspunkt for død af cancer (cancer-specifik overlevelse). Patienter live og patienter, der døde fra ikke-cancer relaterede årsager blev censureret. Overlevelsesdata blev opdateret i februar 2008. overlevelsessandsynligheden blev estimeret ved anvendelse af Kaplan-Meier-metoden [30]. overlevelse analyser Single-variable blev gjort ved hjælp af Wilcoxon og log-rank test og multivariate regression med Cox model [31]. Cox model analyse blev skrevet af kodning som booleske data alle variabler, der nåede et 0,20 p niveau baseret på resultaterne af den univariate analyse. For hver variabel, blev den proportionale hazard antagelse testet grafisk. Overlevelse blev analyseret ved hjælp af SAS-software-pakke.

Resultater

Serum HE4 hos patienter med NSCLC og godartet lungesygdom

Data på befolkningens demografi og sygdom egenskaber er vist i tabel 1. Serum HE4 varierede fra 26 til 356 pmol /L (median = 50 pmol /l) hos patienter med benign lungesygdom (kontroller) og fra 33 til 861 (median = 98 pmol /l) hos patienter med NSCLC (tabel 2) . Arealet under ROC-kurven (AUC), der kvantificerer den samlede evne en markør til at skelne mellem kontroller og patienter, var 0,78 (95% konfidensinterval (CI) [0,74-0,82]) og var statistisk forskellig fra den ikke-diskriminant bisector (z-test:

P

0,0001, fig 1). Anslået HE4 følsomhed vs specificitet ifølge forskellige cut-off er præsenteret i underbyggende oplysninger (S1 tabel). Den Youden indeks J (forskellen mellem sandt positive og falsk positive) var 0,52 og var forbundet med en afskæringsværdi på 53 pmol /l (95% CI [50-67]), svarende til en specificitet på 91% og en følsomhed på 61%. Denne tærskel viste den bedste følsomhed-specificitet forhold i en diagnostisk indstilling.

Statistik anvender to-halet Z-test. Vejviser

korrelation med klinisk-patologiske karakteristika

Serum HE4 niveauer væsentligt afveg efter performance status (p 0,0001), TNM stadie (p 0,0001), nodal status (p = 0,047) og vægttab (p = 0,0001) (figur 2). HE4 og CYFRA 21-1 i serum blev svagt korreleret (Spearman s koefficient r = 0,31, p 0,0001) Ingen forskel i HE4 værdier blev fundet i de tre histo-patologiske subgrupper (p = 0,1325, data ikke vist)

Serum HE4 niveauer væsentligt afveg efter performance status (A), TNM stadie (B) og nodal status (C) og vægttab (D)

HE4 og overlevelse

på tidspunktet for analysen, med et minimum opfølgning på fire år og to måneder, 320 dødsfald (92%) var blevet registreret, hvoraf 302 (87,3%) var kræft-relateret. Syv patienter (2,0%) var tabt for opfølgning og den mediane overlevelse for hele befolkningen var 36,4 uger (30 til 45,6 uger). TNM stadie og nodal status blev dikotomiseret (T1-2 versus T3-4 og N0-1 versus N2-3 henholdsvis) at overholde den proportionale hazard antagelse. De biologiske og kliniske funktioner med en betydelig prognostisk effekt, baseret på univariate analyser, er anført i tabel 3. Blandt dem, der var mange kendte prognostiske determinanter, herunder CYFRA 21-1 [36]. Serum HE4 blev analyseret under anvendelse af to forskellige tærskler: 53 pmol /L diagnostisk afskæringsværdier og 140 pmol /l, fordi dette er den mest anvendte cut-off i litteraturen. Den multivariate analyse præsenteres i underbyggende oplysninger S2 Table. I Cox proportional hazard model, de uafhængige determinanter for et dårligt resultat var fremskredent stadium, dårlig performance status, vægttab, høje leukocytter tæller og høj serum niveau af NSE, CYFRA 21-1 eller HE4 (figur 3). Patienter med forbehandling serum HE4 højere end 140 pmol /l havde en kortere samlet overlevelse sammenlignet med patienter med forbehandling niveau ≤ 140 pmol /l. Konkret median overlevelse var 17,7 uger (95% CI, 11,9 til 24,9) for patienter med serum HE4 højere end 140 pmol /L og 46,4 uger (95% CI, 38,6-56,3) for patienter med serum HE4 ≤ 140 pmol /L [HR: 1,48 (95% CI, 1,12-1,95) for høj HE4; justeret

P

= 0,0057] (Fig 4)

HR:. hazard ratio; NSE: neuron specifik enolase; PS: performance status

Kaplan Meier kurver blev konstrueret under hensyntagen til hele befolkningen overlevelse. MOS: median samlet overlevelse; CI: konfidensinterval

Diskussion

Denne undersøgelse viser, at høje HE4 niveauer i serum er relateret med dårlig NSCLC prognose som patienter med forhøjet serum niveau af HE4 inden behandlingen havde kortere overlevelse. Velkendte ugunstige kliniske funktioner, såsom fremskredent stadium, dårlig performance status og positiv nodal status, blev forbundet med høj HE4 niveau. Da disse sygdom egenskaber er også vigtige prognostiske faktorer, kunne man hypotesen, at HE4 fungerer som en surrogat variabel, når overlevelse analyseres. Men i Cox model, høj HE4 niveau var en uafhængig prognostisk determinant. Udover at HE4 kunne adskille en undergruppe af patienter med kortere overlevelse, dens prognostiske værdi tyder på, at HE4 sekretion kan spille en rolle i NSCLC progression, ligesom i ovariecancer [37].

HE4 er en tumor markør primært undersøgt hos patienter med kræft i æggestokkene. Dette glycoprotein er også en del af det medfødte immunsystem af lungecancer og luftveje og tidligere undersøgelser antydet, at serum HE4 kunne være en markør for NSCLC [27,28,29,38].

Vi sammenlignede HE4 niveau diagnose hos patienter med NSCLC eller lunge godartede sygdomme. ROC-kurven, konstrueret under anvendelse følsomheden-specificitet forhold, indikerede en god nøjagtighed. Ved den optimale skæringspunkt på 53 pmol /l, bestemt med Youden indeks J, serum HE4 præsenteret en følsomhed på 91% og en specificitet på 61%. Vores resultater er lidt forskellige fra dem, der rapporteres i undersøgelsen fra Iwahori et al. [28], som fandt en ROC-AUC på 0,988. Denne uoverensstemmelse kan forklares ved de forskellige kontrol, der anvendes i de to undersøgelser populationer (sund befolkning i arbejdet med Iwahori et al og patienter med benign lungesygdom i vores undersøgelse). ROC-AUC på 0,78 i vores store befolkning kunne betragtes som mere plausibelt i en diagnostisk indstilling. Den formodede nytte af serum HE4 for udvælgelse af kandidater til lavdosis beregnet-tomografi screeningsprogrammer fortjener yderligere undersøgelse.

Det er tidligere blevet foreslået, at serum HE4 følsomhed varierer mellem kønnene [38]. Den overrepræsentation af mandlige patienter i vores undersøgelse (89,9%) udelukket nogen bekræftelse af denne observation. Andelen af ​​SQC mod ikke-SQC i vores undersøgelse afspejler lungekræft taksonomi i ikke-udvalgte europæiske kaukasisk population. Yderligere undersøgelser i andre populationer afspejler mere præcist den nuværende NSCLC epidemiologi (dvs. den stigende forekomst af adenocarcinom og lungekræft hos kvinder) er nødvendige. Man bør være opmærksom på den indflydelse, alder og nyrefunktion på HE4 serumniveauer i fremtidige studier.

Vores undersøgelse prospektivt analyseret biologiske og kliniske variable i 346 patienter med NSCLC henvises til vores institution med et minimum opfølgning af fire år og to måneder. Disse resultater styrker den formodede nytte af denne nye prognostisk markør og dens relative sted i forhold til centrale og i øjeblikket anvendes variable (dvs. performance status, TNM stadie og andre markører, såsom CYFRA 21-1 og NSE). CYFRA 21-1, en omfattende beskrevet NSCLC markering, blev samtidigt vurderet i dette studie og høj forbehandling CYFRA 21-1 niveau blev anset for en uafhængig prognostisk markør. De kongruente hazard ratio for højt CYFRA 21-1 niveau i dette arbejde (1,646; 95% CI, 1.283-2.113) og i den større population (1,41) af en undersøgelse, vi offentliggjorde tidligere støtter pålideligheden af ​​disse overlevelse analyser [39].

Som konklusion, en høj serum HE4 niveau diagnose er en uafhængig faktor for dårlig prognose i NSCLC.

Støtte Information

S1 Table. Anslået HE4 følsomhed vs specificitet

doi:. 10,1371 /journal.pone.0128836.s001

(DOC)

S2 Table. Multivariat analyse

doi:. 10,1371 /journal.pone.0128836.s002

(DOC)

Tak

Undersøgelsen blev støttet af bevilling fra FUJIREBIO Diagnostics. Forfatterne vil gerne takke professor Jean Pierre Daurès, senior statistiker, for nyttige diskussioner, og vi er taknemmelige for fru Viglianti der udførte analyse.