Disse har fået til at være nogle af de bedre holdes OG-L002 hemmeligheder i World

HUR er kendt for at lokalisere til polysomer og stress granulat efter visse former for legetøj og celle læsioner. Vi har bemærket en enorm forskydning af proteinet til tungere polysomalt fraktioner efter Doxo afhjælpe, hvilket indikerer, at proteinet er aktivt deltager i den cellulære reaktion på lægemidlet måske regulere oversættelse udøvelsen af ​​bundne mRNA’er. Vi udnyttede en RIP chip assay at fastslå, hvilke mRNA binder til HUR efter Doxo behandling, til at undersøge HUR respons på Doxo i form af HUR mål.

Efter immunpræcipitering og hybridisering på Agilent arrays, gennem en fold berigelse tolerance, vi filtreret dem mRNA sort særligt bundet til HUR. Vi opdagede mRNA’er svarende til 822 HGNC kommenterede gener, som kan være bundet til HUR og forholdsmæssigt beriget i produktet. Vi forelagde 721 HUR bundet gen rekord til evaluering af funktionelle motiver rundt om 3UTR, at bedømme stabiliteten i vores proces af mRNA berigelse. Da HUR er kendt for at binde til Ares, forventede vi at kigge efter en solid overrepræsentation af ARE udtalelse bindende i 3UTRs af disse gener.

berigelse for ARE var stor og betydningen bevares, selvom du fjerner støt gener med lavere fold berigelse. De første 50 gener er maksimalt beriget i Åre. Fra denne liste valgte vi tre gener at kontrollere konsekvens af genomet brede analyse ved at kontrollere det tilknyttede beløb om immunfældning opløsning via semikvantitativ PCR af c-fos, c-myc og SOCS3. Alle mRNA etableret deres forhold til HUR efter Doxo regering, som vist i figur 5B.

Disse data antyder en involvering af Hur i processen af ​​apoptose aktivering forårsaget af Doxo i vores cellulært modelsystem, der ikke kan forklares ved dannelse af den apoptogenic trunkerede type Hur og at som et alternativ Hur er bundet til specifikke mRNA’er og relocalizes på polysomer efter Doxo terapi. Da Hur nedregulering fremmer et fald i den apoptotiske respons induceret af Doxo og da rottlerin antagoniserer Doxo til induktion tab af levedygtighed, vi spekulerede på, hvis HUR måtte være involveret i indtræden af ​​Doxo modstand.

Vi lægger MCF 7-celler under Doxo samling ved konstant stigende lægemiddelkoncentrationen fra 0 til 100 nM i en måned tidsskala. Vi har modtaget en celle borgerskab, kaldet MCF 7 /doxoR, der viste ca. 250 gange modstand mod Doxo sammenlignet med vildtype MCF 7 celler, som anført af IC50 stigning til ca. 10 uM. Yderligere bekræftelse af erhvervet resistens fænotype opstod i overekspression i MCF 7 /doxoR af ABCG2 transportør, en gennemsnitlig tegn og kendt årsag til Doxo pharmacoresistance, da permissivity til apoptose blev opdaget af caspase 7 sætning. Og-L002

Vi observerede en stærk nedregulering af Hur mens cellerne tilpasset til tilstedeværelsen af ​​Doxo. Vi gentog proceduren for Doxo samling 3 x ofte erhverve den samme indlysende HUR nedregulering, fordi vi fokuserer på befolkninger, reelt sat igennem variabilitet. Mere over, vi placerer under udvælgelsen forskellige to brystcancercellelinier med forskellige charachteristics fra MCF 7 celler: MDA MB 231, tredobbelt dårlige celler, og SK BR 3, HER2-positiv celler.

Vi købte en population af MDAMB 231 celler resistente over for Doxo men ikke en befolkning på SK BR 3 i henhold til de beregnede værdier. Interessant, vi var vidne HUR nedregulering i MDAMB 231 /doxoR men ikke i SK BR 3 /NOdoxoR, hvilket tyder på, at brystkræftceller nedregulerer HUR udtryk, hvis en dyb genetisk omprogrammering mod pharmacoresistance sker og ikke som følge af den blotte tilstedeværelse af Doxo.