PLoS ONE: Menneskelig Vav1 Expression i hæmatopoietiske og kræftceller reguleres af c-Myb og CpG Methylering

abstrakt

Vav1 er et signal transducer protein, der fungerer som en guanin nukleotid udveksling faktor for Rho /Rac GTPaser i det hæmatopoietiske system hvis det udelukkende udtrykkes. For nylig blev Vav1 vist at være involveret i flere humane maligniteter, herunder neuroblastom, lungecancer og pancreas ductal adenocarcinom (PDA). Selv om nogle faktorer, der påvirker

vav1

udtryk er kendt, hverken den fysiologiske eller patologiske regulering af

vav

1-ekspression er helt forstået. Vi demonstrerer heri, at mutationer i formodede transkriptionsfaktor bindende sites på

vav

1 promotor påvirke dens transkription i celler af forskellig histologisk oprindelse. Blandt disse steder er enighed site for c-Myb, en hæmatopoietisk-specifik transkriptionsfaktor, findes også i Vav1-udtrykkende lung cancercellelinjer. Udtømning af c-Myb hjælp siRNA førte til en dramatisk reduktion i

vav

1-ekspression i disse celler. I overensstemmelse hermed co-transfektion af c-Myb aktiveret transkription af et

vav1

promotor-luciferase reportergenkonstruktion i lungecancerceller blottet for Vav1 ekspression. Tilsammen indikerer disse resultater, at c-Myb er involveret i

vav

1 ekspression i lungecancerceller. Vi udforskede også status methylering af

vav

en promotor. Bisulfit sekventering afslørede, at

vav

en promotor var helt methyleret i humane lymfocytter, men methyleres i forskellige grader i væv, der ikke normalt udtrykker

vav

en.

vav

en promotor indeholder ikke CpG øer i nærhed til transkriptionsstartsitet; dog viste vi, at methylering af en CpG dinukleotid ved konsensus Sp1 bindingssted i

vav

en promotor forstyrrer proteinbinding

in vitro

. Vores data identificere to reguleringsmekanismer for

vav

1-ekspression: binding af c-Myb og CpG methylering af 5 ‘regulatoriske sekvenser. Mutation af andre formodede transkriptionsfaktor bindingssteder tyder på, at yderligere faktorer regulerer

vav1

udtryk samt

Henvisning:. Ilan L, Katzav S (2012) Humant Vav1 Expression i hæmatopoietiske og kræftceller er reguleret af c-Myb og ved CpG Methylering. PLoS ONE 7 (1): e29939. doi: 10,1371 /journal.pone.0029939

Redaktør: Pierre-Antoine Defossez, Université Paris-Diderot, Frankrig

Modtaget: August 16, 2011; Accepteret: December 7, 2011; Udgivet: 11 januar, 2012