Abstrakt
Interleukin-17 (IL-17) er udbredt i tumorvæv og undertrykker effektive anti-tumor immunrespons. Imidlertid forbliver kilden til den øgede tumor-infiltrerende IL-17 og dens bidrag til tumorprogression i human gastrisk cancer dårligt forstået. I denne undersøgelse har vi indskrevet 112 gastriske kræftpatienter, immunofluorescens blev anvendt til at evaluere colokalisering af CD3, CD4, CD56, CD20, CD68, og mastcelletryptase (MCT) med IL-17. Immunhistokemi blev anvendt til at evaluere fordelingen af mikrokardannelse densitet (CD34), CD66b
+, CD68
+, og Foxp3
+ -celler i forskellige microanatomical områder. Prognostisk værdi blev bestemt ved Kaplan-Meier analyse og en Cox regressionsmodel. Resultaterne viste, at mastceller, men ikke T-celler eller makrofager, var den dominerende celletype producerer IL-17 i gastrisk cancer. blev påvist signifikante positive korrelationer mellem tætheder af mastcelleafledte IL-17 og mikrokar, neutrofiler, og regulatoriske T-celler (tregs). Futhermore, fandt vi, at størstedelen af vaskulære endotelceller udtrykker interleukin-17 receptor (IL-17R). Kaplan-Meier-analyse viste, at stigende intratumor infiltreret mastceller og IL-17
+ celler, såvel som MCT
+ IL-17
+ celler, var signifikant associeret med ringere samlet overlevelse. Disse resultater viste, at mastceller var den største kilde til IL-17 i gastrisk cancer og intratumor IL-17 infiltration kan have fremmet tumorprogression ved at øge angiogenese i tumormikromiljøet gennem aksen af IL-17 /IL-17R. IL-17-positive mastceller udviste en prognostisk faktor i gastrisk cancer, hvilket indikerer, at immunterapi målretning mastceller kan være en effektiv strategi til at kontrollere intratumor IL-17 infiltration, og dermed vende immunosuppression i tumormikromiljøet, hvilket letter cancerimmunterapi.
Henvisning: Liu X, Jin H, Zhang G, Lin X, Chen C, Sun J, et al. (2014) intratumor IL-17-Positiv mastceller den vigtigste kilde til IL-17 Der Er Predictive af overlevelse i Gastric kræftpatienter. PLoS ONE 9 (9): e106834. doi: 10,1371 /journal.pone.0106834
Redaktør: Xin-Yuan Guan, The University of Hong Kong, Kina
Modtaget: 12. maj 2014; Accepteret: August 1, 2014; Udgivet: 8 September, 2014
Copyright: © 2014 Liu et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres
Data Tilgængelighed:. Det forfattere bekræfter, at alle data, der ligger til grund resultaterne er fuldt tilgængelige uden restriktioner. Alle relevante data er inden for papir og dens Støtte Information filer
Finansiering:. XSL blev støttet af tildelingen af The National Science Foundation of China (81273254 /H1006), https://www.nsfc.gov. cn /. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser
Introduktion
i de seneste årtier har stigende opmærksomhed er betalt til mekanismen (r) undslippe immunosurveillance i tumor mikromiljø og især forholdet mellem betændelse og immunosuppression. En af de vigtigste komponenter i immunsystemet i inflammation associeret med cancer er for nylig blevet anerkendt som interleukin-17 (IL-17). IL-17 har pleiotrope funktioner og flere mål, der har mest været udforsket i musemodeller, men i stigende grad knyttet til humane sygdomme [1] – [5]. IL-17 er blevet identificeret i forskellige tumorer, herunder brystkræft [6], mavekræft [7], [8], kolorektal cancer [9], kræftfremkaldende induceret hudkræft [10], intrahepatisk cholangiocarcinom [11], og hepatocellulær karcinom [12]. IL-17-celler gradvist stige i antal i tumormikromiljøet under tumorudvikling og er korreleret med ringe overlevelse i cancer-beslægtede patienter.
Det har længe været antaget, at den største cellulære kilde til IL-17 er CD4
+ T-lymfocytter (Th17 cells). For nylig, mange undersøgelser rettet mod IL-17 har vist, at IL-17 produktion ikke er begrænset til Th17 lymfocytter, men findes også i en række af adaptive og medfødte immunceller, herunder γδT celler, NKT-celler, NK-celler, mastceller, og granulocytter [3], [13].
mavekræft er en af de mest almindelige typer kræft og en førende årsag til kræft dødsfald på verdensplan [14]. Mere end 1 million nye patienter er diagnosticeret med mavekræft hvert år på verdensplan, 42,5% af dem er i Kina. Traditionelle terapeutiske strategier, herunder kirurgi, kemoterapi og strålebehandling er de vigtigste behandlinger for mavekræft. For nylig, immunterapi af maligniteter er bragt i fokus [15] – [17]. Imidlertid tumorassocieret immunosuppression er en stor udfordring for immunterapi, fordi det svækker den cytotoksiske aktivitet af effektive T-celler og naturlige dræberceller. Under tumor udvikling, er tumor immunosuppression ofte forbundet med overdreven og ukontrolleret betændelse i tumor mikromiljø [18]. Det er velkendt, at flere inflammatoriske celler infiltrerer tumorer, herunder mastceller, makrofager undertyper, neutrofiler, samt T- og B-lymfocytter, et kendetegn for cancerassocieret inflammation [19].
I den aktuelle undersøgelse undersøgte vi de cellulære kilder til IL-17, distribution, funktionel relevans, og prædiktive værdi af IL-17-celler i 112 patienter med gastrisk cancer. Vi tilvejebringe nye indsigter i den potentielle virkningsmekanisme (r) af IL-17 i tumormikromiljøet i patienter med gastrisk cancer ved at vurdere forholdet mellem IL-17-producerende celler og inflammatoriske mediatorer. Vores mål er at give flere oplysninger, som kan være nyttige for at designe mere effektive kræft immunterapi, der er målrettet IL-17.
Materialer og metoder
Etik erklæring
Før forskning informerede samtykke blev opnået fra hver patient. Passende tilladelse blev givet af den etiske komité af First Affiliated Sygehus, Medical College, Zhejiang University.
Patientprøver
I alt 112 patienter mellem februar 2009 og marts 2010 i vores hospital blev inkluderet . Patienter, som overholder følgende kriterier blev udvalgt: a) diagnosticeret som gastrisk kræft baseret på patologi; b) modtog effektiv resektion. Udelukkelseskriterierne var patienter, som havde tegn på fjernmetastaser, beviser af samtidig autoimmun sygdom, HIV eller syfilis og patienter, som fik anticancerterapi inden operation. Kriterierne for effektiv resektion blev defineret som resektion uden residual tumor (R0) eller mikroskopisk residual tumor (R1) efter 7
th udgave af den amerikanske Joint for Udvalget om kræft. Efter helbredende resektion fik patienterne adjuverende kemoterapi baseret på 5-fluoruracil og platin i overensstemmelse med den patologiske TNM klassifikationen. Patienterne blev fulgt op med 3-6 måneders interval, herunder analyser af deres perifere blod for tumormarkører og ultralydsundersøgelse, og forbedret CT hver 6. måned, endoskop hver 12. måned. Kliniske karakteristika af patienter er vist i tabel 1.
Immunhistokemi og Immunofluorescens
Rutinemæssig hæmatoxylin og eosin-farvning blev udført for at bekræfte den patologiske diagnose, intratumor region blev defineret som mindre end 2 cm grænser op til margenen af maven tumor, mens den normale region blev defineret som mindst 5 cm grænser margenen på maven tumor.
Immunhistokemi
Immunhistokemi blev udført som beskrevet i vores tidligere undersøgelse [20 ]. Primære antistoffer blev gede-anti-IL-17 (R andelene af IL-17-udtrykkende celler pr overflademarkør blev beregnet. Alle analyser blev udført af to uafhængige, blindede observatører (GE Z og XK L), og de gennemsnitlige tællinger af de to observatører blev brugt i den følgende analyse.
Statistisk analyse
De medianværdier af CD34
+, CD66b
+, CD68
+, foxp3
+, og mastcelletryptase (MCT
+) og IL-17
+ celler blev anvendt som tilskårede offs at definere undergrupper i vores resultater. Students t-tests blev anvendt til at sammenligne infiltration af forskellige immuncelleundergrupper i tumorvæv og tilsvarende normalt væv. Chi-squared test blev anvendt til at vurdere forholdet mellem IL-17-producerende celler og klinisk-patologiske træk. Korrelationer mellem mikrokar densitet (CD34), neutrofiler (CD66b), makrofager (CD68), regulerende T-celler (Foxp3), og IL-17-celler blev vurderet ved anvendelse af Pearsons eller Spearmans korrelationskoefficient. Samlet overlevelse blev defineret som intervallet mellem tidspunktet for kirurgi og dødsdagen eller sidste opfølgning, alt efter hvad der forekom tidligere. Overlevelsesfunktionen skøn blev beregnet ved hjælp af Kaplan-Meier-metoden. En Cox proportional hazard model blev anvendt til at vurdere virkningen af IL-17-producerende celler på den samlede overlevelse. En to-sidet p-værdi 0,05 blev anset for at indikere statistisk signifikans. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af GraphPad Prism (ver 5.00 for Windows;. GraphPad Software, San Diego, CA, USA) og SPSS. (Ver 16,0;. SPSS Inc., Chicago, IL, USA) software
Resultater
studiepopulation
Patienternes egenskaber er vist i tabel 1. i alt blev 78 mænd og 34 kvinder tilmeldt. Alderen på den undersøgte population varierede fra 33 til 89 (median 60) år. Af de 112 mavecancerpatienter, H. pylori-infektion status var positiv for 65 patienter, mens 47 var negativ. 110 patienter modtog R0 resektion og 2 patienter fik R1 resektion. Patologiske TNM klassifikationer var baseret på 7
th udgave af den amerikanske Joint fra Udvalget om Kræft: 33 patienter havde ingen lymfeknude metastaser, mens 21 var N1, 22 var N2, og 36 var N3. 1 patient tilhørte Tis, 23 patienter tilhørte iscenesætte I, og 25, 63 patienter til fase II, III, henholdsvis. 3 (2.7%) patienter tabte til opfølgning og 39 (34,8%) patienter døde i observationsperioden. Den mediane opfølgningstid var 51 måneder, der spænder fra 39 til 57 måneder og de samlede overlevelse (OS) satser var 83,0% efter 1 år, 71,4% efter 3 år, og 65,7% på 4 år, hhv.
IL-17 blev udtrykt overvejende af MCT
+ mastceller Salg
Tilfældige prøver af 20 patienter fra hele kohorte blev anvendt til at vurdere fordelingen og fænotypen af IL-17-producerende celler i intratumor region og den tilsvarende normale væv (fig.1). Vi fandt cytoplasmatisk IL-17-farvning i celler med en æggeformet fænotype, som tidligere [13] beskrevet, og i celler i en mere uregelmæssig form. Endvidere fandt vi, at de IL-17-udtrykkende celler var hyppigere i intratumor væv end normalt væv. At identificere de IL-17
+ -celler i intratumor væv, udførte vi co-lokaliseringstoppe eksperimenter og beregnet andelen af IL-17
+ -celler i hvert undersæt. Første har vi udført colokalisering af c-kit, en yderligere mastcelle markering, med mastcelletryptase (MCT), viste resultaterne, at alle MCT
+ celler, der udtrykker c-kit (fig. S1), hvilket indikerer, at MCT kunne være anvendes til identificerede mastceller repræsentativt. I celler af den ægformede fænotype, valgte vi en række T-celle, B-celle, og NK cellemarkører: specifikt, CD3, CD4, CD20, og CD56, og vurderet deres co-lokalisering med IL-17. Imidlertid blev CD20
+ IL-17
+ og CD56
+ IL-17
+ celler identificeret, om end sjældent ( 1% Fig.2, øvre højre paneler). Selvom lejlighedsvis CD3
+ IL-17
+ og CD4
+ IL-17
+ celler blev observeret, var de gennemsnitlige procentdele af IL-17
+ celler i begge delmængder var 12,4% ( 2,2-34,1%) og 8,4% (0-26,7%, Fig.2, øvre venstre paneler, tabel 2) Vi næste undersøgte fænotype af IL-17
+ celler af uregelmæssig form; makrofager er blevet foreslået som potentielle kilder til IL-17 produktion [22]. I overensstemmelse hermed op til 18,5% af IL-17-producerende celler i gastrisk cancer væv blev makrofager (Fig.2, nederste venstre panel; tabel 2). Men de fleste af IL-17-producerende celler forblev ukendt. For at bestemme om mastceller var en yderligere kilde til IL-17-produktion i gastrisk cancer, udførte vi colokalisering af IL-17 og mastcelletryptase (MCT). Vi fandt, at størstedelen af IL-17
+ celler colocalized med MCT
+ -celler. (40-60% af IL-17
+ -celler; fig.2, nederste højre panel, tabel 2)
Squares angiver forskellige eksempler (brun, vist ved 400 × forstørrelse).
Sektioner blev modfarvet med DAPI. Markører for CD3 eller CD4 (grøn) og B-cellemarkøren CD20 (grøn), natur killer (NK) markør CD56 (grøn) og makrofag markør CD68 (orange), samt mastcelletryptase (MCT) (orange) er vist ved 400 × forstørrelser.
Fordeling af MCT
+ IL-17
+ celler og korrelation med klinisk-patologiske træk
for at bekræfte, at mast-celle-afledt IL-17 var en væsentlig cellulær kilde til IL-17 i gastrisk cancer mikromiljø, udførte vi immunofluorescens dobbelt-farvning af intratumor og normale prøve væv fra de 112 patienter. Størstedelen af IL-17
+ celler dobbelt-farvet kraftigt med MCT (14-68,1% af IL-17 udtrykkende celler) i intratumor væv (fig. 3A). Vi fandt, at tætheder af MCT
+ mastceller og IL-17
+ celler i intratumor væv blev fundet at være betydeligt højere end i normale væv (MCT
+
T vs. MCT
+
N, 10,02 ± 4,06 vs. 8,66 ± 3,29, p = 0,0023; IL-17
+
T vs. IL-17
+
N, 8,16 ± 3,89 vs. 7,18 ± 3,48, p = 0,0165;. figur 3B). Endvidere er densiteten af MCT
+ IL-17
+ celler i intratumor væv var betydeligt højere end i normalt væv (4,55 ± 2.48 vs. 3,93 ± 2,24, p = 0,0154;. Figur 3B).
A. Mastceller meget express IL-17 i gastrisk cancer (fusionerede i gul, højre panel). B. MCT
+ -celler og IL-17
+ -celler, såvel som MCT
+ IL-17
+ celler i intratumor væv var signifikant højere end i tilsvarende normale væv.
for at identificere væsentlige sammenhænge mellem klinisk-patologiske funktioner og MCT
+ IL-17
+ celler, chi-squared test eller Fishers eksakte test blev anvendt (vist i tabel 1). Imidlertid MCT
+ IL-17
+ celler i intratumor væv korrelerede ikke med nogen klinisk egenskab evalueret, herunder H. pylori-infektion status, tumorstørrelse, grad af differentiering og klassificering af TNM.
Øget intratumor MCT
+ celle, IL-17
+ celle, og MCT
+ IL-17
+ celledensiteter blev korreleret med dårlig samlet overlevelse
På univariat analyse (tabel 3), det konventionelle klinisk-patologisk har prædiktiv for dårlig samlet overlevelse (OS) var dårligt differentierede tumorer, og avanceret TNM stadie. For yderligere analyse blev numre af MCT
+ celler, IL-17
+ celler, og MCT
+ IL-17
+ celler opdelt i to grupper: over og under medianværdier. Kaplan-Meier-overlevelseskurver blev fremstillet under anvendelse af log-rank test for yderligere at undersøge sammenhængen med OS. Patienter med høje antal af intratumor infiltrerer MCT
+ celler og IL-17
+ celler havde en dårligere OS end dem med lavere antal MCT
+ celler (p = 0,004) og IL-17
+ celler (p = 0,014, fig. 4B). Derudover patienter med højere antal MCT
+ IL-17
+ celler havde kortere overlevelse varighed end dem med lavere antal MCT
+ IL-17
+ celler (p = 0,018, Fig. 4C).
(a) Det overordnede overlevelse for alle indskrevet 112 patienter (B) høj intratumor IL-17
+ celler infiltration tillagt en betydelig høj risiko for død. (C) Patienter med højt MCT
+ IL-17
+ celle intratumor havde signifikant dårligere overlevelse end patienter med lav MCT
+ IL-17
+ celle.
Variabler af P 0,1 i univariate analyser blev medtaget i en multivariat Cox proportionel risiko analyse, fandt vi, at både intratumor MCT-positive celler (HR = 2,057; 95% CI: 1,048-4,037; p = 0,036) og TNM trin (HR = 3,832; 95% CI: 1,679-8,745; p = 0,001) var uafhængige prognostiske faktorer (tabel 3). Hvilket indikerer, at patienter med højere antal intratumor MCT-positive celler var næsten 2,1 gange mere tilbøjelige til at dø end dem med lavere antal af disse celler.
Immunohistokemiske egenskaber og sammenhængen mellem MCT
+ IL-17
+ celledensitet og immunokemiske variabler
IL-17 er en kendt proinflammatorisk faktor, som kan fremme tumorvækst ved at fremme angiogenese og rekruttere neutrofiler, samt rekruttering af andre inflammatoriske og immune celletyper. At udforske det potentielle mekanisme (r) af IL-17 ophobning i tumor mikromiljø med dårlig prognose. Vi udførte immunhistokemi for forskellige inflammatoriske mediatorer, især, mikrokar tæthed, neutrofiler, makrofager og regulatoriske T-celler i hele studiepopulationen (
n
= 112). Repræsentative områder af CD34
+ mikrokar, CD66b
+ neutrofiler, CD68
+ makrofager, og foxp3
+ regulatoriske T-lymfocytter i intratumor og normalt væv er vist i fig. 5A. De tætheder af intratumor CD34
+ mikrokar (p = 0,0030), CD66b
+ neutrofiler (p 0,0001), CD68
+ makrofager (p 0,0001) og foxp3
+ regulatoriske T-lymfocytter (p 0,0001). Imidlertid korrelationerne mellem MCT
+ IL-17
+ celler og neutrofiler (r = 0,2578, p = 0,0061) og tregs (r = 0,2898, p = 0,0021) var svarende til den af IL-17
+ celler (vist i figur 6).
(A) CD34
+ mikrokardannelse tæthed. (B) CD66b
+ neutrofiler. (C) CD68
+ makrofager. (D) Foxp3
+ lymfocytter. P-værdier blev bestemt ved Pearson korrelationskoefficienten for CD34
+ mikrokar og foxp3
+ lymfocytter, mens Spearman korrelationskoefficient blev anvendt til CD66b
+ neutrofiler og CD68
+ makrofager analyse.
colokalisering mellem IL-17R og forskellige inflammatoriske og immune celler
for at undersøge mekanismen (erne) under nøje forhold mellem IL-17 producerende celler og MVD, samt andre inflammatoriske og immune celler. Vi udførte co-lokaliseringstoppe eksperimenter for at evaluere ekspressionen af IL-17R i vaskulære endotelceller, neutrofiler, makrofager og regulatoriske T-celler (tilfældig valgt, n = 20). Vores resultater viste, at størstedelen af vaskulære endotelceller udtrykker IL-17R (6-58% af vaskulære endotelceller, fig.7) i intratumor væv. I overensstemmelse med vores hypotese, knap neutrofiler og regulatoriske T-celler blev påvist udtrykker IL-17R. Interessant nok fandt vi ekspression af IL-17R i overfladen af tumorceller. (Fig. S2).
Diskussion
Immun flugt spiller en central rolle i tilblivelsen og udviklingen af kræft. De mediatorer og cellulære effektorer i immunsystemet er vigtige bestanddele i en immunsuppressiv tumor miljø. Rollen af interleukin-17, som et pro-inflammatorisk faktor, har tiltrukket opmærksomhed for nylig i cancere, autoimmune sygdomme og immundefektsygdomme. CD4
+ Th17 celler blev længe anset for at være den eneste cellulære kilde til IL-17 i human tumor mikromiljø [23]. Imidlertid har flere og flere tegn vist, at forskellige celletyper kan producere IL-17 [3], [24]. Mastceller, en vigtig cellulær komponent i det medfødte immunsystem, er blevet anerkendt som en vigtig cellulær kilde til IL-17. Faktisk kan de skaber og /eller udskiller en række cytokiner og chemokiner, der bidrager til immunforsvaret og inflammation, herunder rekruttering af leukocytter og vaskulære celleproliferation. For nylig er det blevet påvist, at mastceller infiltrere tumormikromiljøet via SCF /c-kit signalvej, hvilket fører til forværring af inflammation og immunsuppression [25]. Mast-celle-afledt IL-17 er blevet undersøgt i flere autoimmune sygdomme, herunder rheumatoid arthritis [13], psoriasis [26], og spondylarthritis [27], hvori mastceller var en væsentlig cellulær kilde til IL-17, og viste en stærk sammenhæng med patogenese og sygdomsprogression. Imidlertid forblev kilden til den øgede tumor-infiltrerende IL-17-niveau og bidraget til progressionen af tumoren, samt den underliggende mekanisme (r), dårligt forstået.
I nærværende undersøgelse observerede vi at IL-17-udtrykkende celler i humane gastriske cancer prøver udviste to fænotyper. Nogle havde en forholdsvis almindelig fænotype, ægformede /plasmacytoide former, men nogle havde mere uregelmæssige former. Endvidere fandt vi, at IL-17
+ -lymfocytter omfattede kun ~ 10% af IL-17-udtrykkende celler, i modsætning til tidligere undersøgelser i humane tumor mikromiljøer [7], [23]. For nylig, Bo Wang et al. [28] fandt, at mastceller, men ikke T-celler eller makrofager, var den fremherskende type udtrykker IL-17 i esophageal pladecellecarcinom væv. Interessant, vi også fundet, at hovedparten af IL-17
+ -celler colocalized med MCT
+ -celler (14-68,1% af IL-17
+ -celler), hvilket indikerer, at mastceller var den dominerende cellekilde af IL-17 i humane gastriske cancere. Flere undersøgelser har vist, at IL-17 hæmmer immunovervågning og fremmer angiogenese og carcinogenese i tumorer [1], [29], hvilket tyder på, at inflammation miljø drevet af niveauer af endogent IL-17 kan bidrage til tumorudvikling. Vores resultater viste, at niveauet af IL-17-udtrykkende celler var højere i tumorvæv prøver end de tilsvarende normale vævsprøver og at mast-celle-afledt IL-17 var mere hyppigt forekommende i humane gastriske cancere. Kaplan-Meier analyse viste, at intratumorale IL-17
+ celler og intratumoral MCT
+ IL-17
+ celler blev korreleret med dårligere overlevelse i humane mavecancerpatienter.
Den præcise mekanisme (e) for den associering mellem stigende niveauer af IL-17 i tumormikromiljøet og tumorprogression remain (s) uklar. En undersøgelse rapporterede, at IL-17 fremmer tumor udvikling gennem rekruttering af myeloide afledte suppressorceller (MDSCs), såsom CD11b
+ Gr1
+ celler, til tumoren miljøet [30]. I mellemtiden har flere undersøgelser vist, at IL-17 kan forøge væksten af vaskulære endotelceller og påvirke det angiogene fremskridt ved at forøge sekretionen af cytokiner, såsom TNF-α, IL-8, og VEGF [29], [31], herunder en undersøgelse, der rapporterede IL-17-medieret parakrin netværk fremmer tumor resistens over for antiangiogen terapi [32]. I overensstemmelse hermed vores resultater viste en signifikant korrelation mellem MVD og IL-17
+ -celler. Det er blevet fastslået, at mastceller kunne stimulere vaskulær proliferation [33], i vores undersøgelse fandt vi en mere signifikant sammenhæng mellem MVD og MCT
+ IL-17
+ celler, som dokumenterer, at disse IL-17 producerende mastceller har stærkere effekt på at fremme angiogenese. Desuden fandt vi, at størstedelen af vaskulære endotelceller udtrykker IL-17R, mere interessant, fandt vi, at gastriske cancerceller var positive for IL-17R. Tidligere undersøgelser har rapporteret, at IL-17R-ekspression var forbundet med tumor malignitet [34], [35]. Kombinere disse resultater, kan IL-17 infiltration har fremmet tumorprogression ved at øge angiogenese i tumormikromiljøet gennem aksen af IL-17 /IL-17R, funktion på vaskulære endotelceller og tumorceller. En anden mulig mekanisme ligger i rekrutteringen af inflammatoriske celler ved IL-17, såsom neutrofiler og makrofager. Det er blevet påvist, at IL-17 fremmer tumor progression gennem direkte indvirkning på rekruttering af neutrofiler [36], [37]. I vores undersøgelse, intratumoral IL-17
+ -celler og MCT
+ IL-17
+ -celler begge viste svage, men signifikante, korrelationer med antallet af intratumor neutrofiler, mens intratumor makrofager viste ingen betydning. Selv, knapt neutrofiler blev fundet udtrykker IL-17R. Mast-afledt IL-17 kan spille en central rolle i rekrutteringen af neutrofil af CXC chemokiner, såsom CCL2, som tidligere [38] beskrevet. Beviser fra forskellige kræftformer, viser, at andelen af regulatoriske T-celler (tregs) øges i tumorvæv hos patienter med flere maligniteter [39], [40]. Det er blevet rapporteret, at tregs rekruttering havde en central rolle i etableringen af en VEGF-rige tumormikromiljøet og stigende tumorangiogenese [41]. Tidligere undersøgelse har rapporteret den regulerende rolle af mastceller, idet de indvirker med konventionel CD4
+ T-celler til frembringelse af IL-10 producerende regulatoriske T-celler gennem aksen af ICOSL /ICOS [42]. Ganeshan et al. [43] rapporterede, at tregs faktisk forbedre, snarere end inhiberer, mast celle produktion af IL-6, en pleiotropisk cytokin, som har vist sig at spille en afgørende rolle i reguleringen af balancen mellem IL-17-producerende celler og foxp3
+ T regulerende celler. Således kan eksistere intense korrelationer mellem tregs og IL-17-producerende mastceller. I vores undersøgelse viser overensstemmelsen mellem IL-17
+ celler og tregs var svag, men signifikant, samt MCT
+ IL-17
+ celler. Disse resultater viste, at IL-17 producerende mastceller kan inducere differentieringen og akkumulering af tregs ved at udskille forskellige af cytokiner og chemokiner, som skal belyses yderligere.
Så vidt vi ved, er dette den første rapport fra fænotype og distribution af intratumor IL-17-celler og deres kliniske relevans, og især den prognostiske værdi af intratumor mastcelleafledte IL-17 i gastrisk cancer. Vore data viser, at de fleste IL-17-celler var mastceller, hvorimod IL-17
+ -lymfocytter var sjældne. Endvidere fandt vi, at intratumorale IL-17
+ -celler og intratumoral MCT
+ IL-17
+ celler blev korreleret med ringere overlevelse. Men mekanismen (er) af mastcelle infiltration i tumormikromiljøet og den specifikke mekanisme mellem overudtrykker IL-17 og de inflammatoriske og immune celler forbliver stort set ukendt. Desuden den karakteristiske funktion lagres og sekretorisk IL-17 stadig behov for at blive vist. Således prospektive undersøgelser med fokus på mast celle rekruttering og IL-17-produktion i maven tumor mikromiljø er nødvendige for at vurdere den prædiktive værdi af intratumor mast-celle-afledt IL-17 yderligere.
Støtte oplysninger
figur S1.
colokalisering mellem c-kit og mastcelletryptase (MCT)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0106834.s001
(TIF)
Figur S2.
colokalisering mellem IL-17R (grøn) og neutrofiler, makrofager, regulatoriske T-celler (orange)
Doi:. 10.1371 /journal.pone.0106834.s002
(TIF)
Tak
Vi takker Lin Zhou, Haiyang Xie og Xiaowen Feng i Key Lab af kombineret Multi-organtransplantation, Ministeriet for Folkesundhed, First Affiliated Sygehus, School of Medicine, Zhejiang University for teknisk support i Immunohistokemi og Immunofluorescens.
Leave a Reply
Du skal være logget ind for at skrive en kommentar.